بررسي شيوع آلودگي ويروس سيتومگال انساني در اهداكنندگان خون به پايگاه انتقال خون شيراز به روش ELLSA و مقايسه آن با روش Nested-PCR

زهرا هاشمي زاده¹ – محمد معتمدي فر¹- مازيار ضيائيان²- اردشير تراب جهرمي³- ليلا كسارائيان³- علي مروج²

1- دانشكده پزشكي دانشگاه علوم پزشكي شيراز 2- مركز تحقيقات ميكروب شناسي باليني استاد البرزي دانشگاه علوم پزشكي شيراز 3- سازمان انتقال خون شيراز- مركز فارس

مقدمه: ويروس سيتومگال انساني (HCMV) يكي از اعضاء خانواده هرپس ويريده و زيرخانواده ي بتاهرپس ويرينه مي باشد, عفونت اوليه با اين ويروس در افراد با ايمني سالم معمولاً بدون عوارض بوده ولي به دنبال آن ويروس تا پايان عمر در بدن فرد به صورت نهفته باقي مي ماند, اين ويروس عامل عمده ي عفونت و درگيري شديد در بيماران با ضعف سيستم ايمني از جمله دريافت كنندگان پيوند بوده و عفونت اوليه با اين ويروس در زنان باردار مي تواند صدمات زيادي از جمله ناراحتي هاي سيستم اعصاب مركزي بر جنين هاي آنها وارد كند, در نوزادان نارس داراي ضعف سيستم ايمني مبتلا به HCMV به دنبال دريافت خون يا فراورده هاي خوني ميتواند سبب ايجاد بيماري هاي شديد گردد. درگيري كه با تعداد دفعات دريافت محصولات خوني و يا حجم آنها ارتباط دارد با توجه به طيف وسيع بيماران دريافت كننده ي خون ومحصولات آن, مانند بيماران پيوندي, مبتلايان به لوكمي و موارد كم خوني, آگاهي از شيوع عفونت با اين ويروس با استفاده  از روش هاي مولكولي در كنار روش هاي تشخيص آنتي بادي در اهدا كنندگان خون در شيراز ضروري به نظر مي رسيد. به كمك نتايج اين مطالعه اطلاعات مفيدي از وضعيت پراكندگي ويروس در جامعه بدست آمده كه با درك ميزان خطر بروز اين عفونت درگيرندگان خون, بكارگيري روش هاي صحيح جهت پيشگيري و درمان اين بيماري مدنظر قرار گيرد.

مواد و روشها: از تعداد 364 نفر شخص سالم داوطلب اهداي خون, درمركز انتقال خون شيراز 10 ميلي ليتر نمونه ي خوني گرفته و سرم آن جدا گرديد. برروي اين نمونه ها جهت روش شدن وضعيت حضور IgM, IgG اختصاصي ضد HCMV تست اليزا به صورت مجزا انجام شد. از طرف ديگر لايه ي سلولي بافي كت از نمونه ي اگزالاته ي 100 نفر از همين افراد جدا شد و پس از شستشوي متوالي با PBS و شمارش سلول هاي آنها, از 5*⁶ 10سلول DNA ويروس سيتومگال در آنها بررسي شد. در ادامه برروي سرم 20 نفر از افراد Seropsitive و4 نفر از افراد Seronegative نيز Nested-PCR صورت گرفت.

نتايج: از تعداد 364 نمونه ي سرمي تعداد 360 مورد داراي IgG اختصاصي عليه HCMV بودند و از همين تعداد نيز 16 مورد داراي IgM اختصاصي ضد ويروس بودند. از 100نفري كه برروي لايه سلول هاي سفيد خوني آنها Nested-PCR انجام شده بود در 64 نفر از آنها وجود ژنوم ويروس دراين سلول ها نشان داده شد از طرف ديگر از 20 نفري كه هم داراي آنتي بادي ضد ويروس بودند و هم در لايه بافي كت آنها ژنوم ويروس ديده شده بود تنها 8 نفر از آنها در سرمشان بوسيله ي PCR ژنوم ويروس تشخيص داده شد دربافي كت و سرم4 نفر Seronegative , DNA ويروس سيتومگال انساني ديده نشد.